本文利用安益谱公司 Anyeep TQ9100超高效液相色谱串联质谱系统，建立了一种同时检测人血浆中15种胆汁酸含量的方法。该方法线性良好，定量限满足相关标准要求。利用本方法和设备可实现对胆汁酸的检测和定量。
胆汁酸是胆汁的主要功能成分，参与肝肠循环，其含量是衡量肝胆功能正常与否的重要标志物。目前，胆汁酸检测的主要应用场景为妊娠期肝内胆汁酸淤积症（Intrahepatic Cholestasis of Pregnancy, ICP）的筛查。
目前临床上针对15种胆汁酸主要使用 LC-MS/MS 法进行分析测定，该方法简便、灵敏，特异性好。因此，本方法采用 Anyeep TQ9100液相色谱串联质谱系统，测定人血清中胆酸（CA）、甘氨胆酸（GCA）、牛磺胆酸（TCA）、脱氧胆酸（DCA）、甘氨脱氧胆酸（GDCA）、牛磺脱氧胆酸（TDCA）、鹅脱氧胆酸（CDCA）、甘氨鹅脱氧胆酸（GCDCA）、牛磺鹅脱氧胆酸（TCDCA）、熊脱氧胆酸（UDCA）、甘氨熊脱氧胆酸（GUDCA）、牛磺熊脱氧胆酸（TUDCA）、石胆酸（LCA）、甘氨石胆酸（GLCA）、牛石氧胆酸（TLCA）。
Instruments and Reagents
Anyeep TQ9100 Ultra-High Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry System
乙腈（质谱纯，美国 Thermo Fisher 公司）
Water (Ultra-pure Water)
Formic Acid (Merck KGaA, Germany)
Liquid Chromatography Conditions
Mobile PhaseA: 0.1% formic acid, water
Mobile Phase B: Acetonitrile
Chromatography column：Agilent Poroshell 120 EC C18 column 2.1mm×100mm 1.9 μm
Column Temperature：40 ℃
Flow rate: 0.25 mL/min
Injection volume：5 μL
Mass Spectrometry Conditions
Ionization Source： Electrospray Ionization Source (ESI)﹣）
Source Temperature： 550 ℃
Spray Voltage： 2500 V
air curtain： 10 psi
Mist gas： 50 psi
Auxiliary Gas： 55 psi
Crash： 8
Scan Mode：MRM
Sample Processing
Retrieve test sample 100 μL，加入20 μL内标，380 μL乙腈，涡旋混匀并离心（4 ℃，15000 rpm，5 min）；取上清液400 μL于96孔板中，40 ℃氮吹至干；加入100 Reconstitute in μL of solution (50% acetonitrile) on a microplate shaker for 1200. rpm/min shaking 5 min, 4000 rpm 离心5 min, 5 μL进样。
Summary
本方法使用安益谱全自主研发生产的 TQ 9100三重四极杆串联质谱系统，实现了血浆中15种胆汁酸的同时检测，该方法线性好、准确度高、特异性强，每个样本分析仅需6分钟，具有较高的通量，适合临床检测分析。